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  • 細胞爬片是什么?

    發布日期:2023-02-08 16:47:28   瀏覽量 :84
    unknown unknown 發布日期:2023-02-08 16:47:28  
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    細胞爬片又名爬片,就是讓玻片浸在細胞培養基內,細胞在玻片上生長,主要用于組織學,免疫組織hua學,冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等,細胞爬片是根據實驗研究的需要,使貼壁細胞在一定的固相表面(如蓋玻片、載玻片)上貼壁生長而獲得的一種體外細胞實驗材料。
    我們在做免疫熒光(IF),激光共聚焦(Confocal),凋亡檢測(TUNEL)時,免不了要制備細胞爬片,爬片質量*決定了后拍照的質量以及實驗數據的性。
    在醫學生物研究中,免疫熒光檢測等需用到細胞爬片?,F有的細胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫熒光檢測時,為了節約抗體,需免疫組化筆在爬片上進行范圍的圈定,將抗體加入劃定區域,免疫組化筆中的疏水成分阻滯抗體溢出所圈定的范圍,從而達到節約抗體的目的。
    但在實際使用過程中,會有大量免疫組化筆的成分混入目標范圍內,且線條粗大,造成樣品數量減少,同時混入目標范圍內的免疫組化筆的成分容易造成背景噪聲及雜質影響免疫熒光的結果,嚴重影響實驗結果的準確。

    爬片的準備:
    1、爬片可用一般的蓋玻片,也可用爬片;
    2、應用蓋玻片,可根據自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;
    3、將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再用三蒸水沖洗3遍(個人認為主要目的是沖洗干凈就可以了),放在飯盒或者培養皿(一定是玻璃的哦,要不然就……)中烘干后進行高壓消毒。

    培養板的準備:
    1、泡酸過夜
    2、沖洗,烘干(1、2步驟與前大致相同)
    3、放入超凈工作臺用紫外線照1~2小時就可以用了(在照之前可以將爬片一并放入,若細胞貼壁能力不強,可經多聚賴氨酸浸片后放入。貼壁能力強的話,就可以省略了,進行紫外線消毒)

    注:此步自己的經驗是爬片可以先浸入消毒后的PBS內,緊接著放入培養板內。目的:浸過PBS的爬片依靠表面的液體,可以用培養板孔底貼和緊密,以利于細胞長到爬片上。

    細胞
    爬片
    目的
    免疫熒光
    公司 浙江聯碩生物科技有限公司
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